2021年湖南师范大学硕士研究生入学考试自命题科目考试大纲

考试科目代码：复试笔试科目         考试科目名称： 基因工程

一、考试内容及要点

第一章  基因工程概述                                                               

基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的标志，基因工程有哪些主要应用？

第二章  基因工程的工具酶                                                                     

基因工程的工具酶有哪些？限制性内切核酸酶的特点，同尾酶与同裂酶的概念，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，DNA连接酶的作用， 碱性磷酸酶的作用及用途，末端脱氧核苷酸转移酶的作用,一步克隆法的原理等。

第三章  基因工程的载体

基因工程载体的概念及必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征与基本结构，λ噬菌体载体的携带能力，COS位点的作用，克隆载体的概念，人工微小染色体的概念，质粒载体的标记基因的种类。什么是α互补？表达载体的概念与基本结构，T7噬菌体启动子系统的组成、融合蛋白表达系统的概念与载体结构，真核表达系统的载体组成等。

第四章 目的基因的获取与制备                                                                  

1.基因文库

基因组文库的概念，基因组文库的构建方法， cDNA文库的概念和构建流程，构建cDNA文库需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二条链有哪些方法，基因文库的载体类型等。

2.PCR技术

PCR技术的基本原理，PCR反应体系的主要成分，PCR反应主要程序。逆转录PCR、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念与原理，Ct值的概念。

3.蛋白质工程

蛋白质工程的概念，PCR介导定点突变的原理。

第五章 目的基因转入受体细胞的方法

目的基因转入大肠杆菌细胞的方法，感受态细胞的概念。目的基因转入植物细胞的方法，花粉管诱导法的概念，基因枪法的概念，Ti质粒的结构，T-DNA的作用，双元载体的组成，Ti质粒介导外源基因导入植物细胞的机制。显微注射法的概念，逆转录病毒介导法的概念，精子载体法，体细胞克隆法的概念。

第六章 目的基因重组子的鉴定

核酸分子杂交的概念，探针的类型与标记方法。Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理以及三者之间的比较。末端终止法DNA测序的基本原理， DNA自动测序的基本原理,二代DNA测序的类型，焦磷酸测序的原理，Solexa测序的原理，单细胞测序的原理。

第七章 基因工程在基因功能研究中的应用                                            

1.基因表达谱的研究

胚胎原位杂交的概念，基因芯片的概念与类型，基因芯片的流程与应用。

2. 基因突变与基因敲除

转座子诱变的原理与优点，基因敲除的概念与流程，条件基因敲除的原理与优点，Cre酶的作用方式，LoxP序列的作用，RNA干扰的概念与分子机制，RNA干扰的优点与应用。TALEN打靶技术的原理和优点，DNA断裂修复的类型，CRISPR的概念，CRISPR基因编辑的原理，CRISPR基因编辑的应用。

3.基因的相互作用研究

凝胶迁移阻滞实验的原理与应用，染色质免疫沉淀的原理与应用，酵母双杂交系统的原理与应用，免疫共沉淀的原理等。

第八章 转基因植物                                                                             

1.转基因植物的制备

外源基因导入植物的方法， Ti质粒的结构特点， Ti质粒介导植物基因转移的过程。

2.转基因植物的现状

抗虫转基因植物的概念，抗除草剂转基因作物的概念。植物生物反应器的概念。转基因生物的安全性和主要影响因素等。

第九章 转基因动物                                        

转基因动物的概念，显微注射法制备转基因动物的主要过程。逆转录病毒法制备转基因动物的主要过程。胚胎干细胞的概念。胚胎干细胞制备转基因动物的流程。体细胞核移植法及其制备转基因动物的主要流程。动物器官生物反应器的概念。转基因小鼠的鉴定方法。

第十章 基因治疗                                                                                

 　基因治疗的概念，基因治疗的基本策略，基因治疗的载体类型。单基因遗传病的基因治疗策略，肿瘤基因治疗的策略，耐药基因治疗的概念，自杀基因治疗的概念等。CAR-T的概念与优点。艾滋病基因治疗的策略等。

二、参考书目

1.   袁婺洲编著，《基因工程》，第二版。北京化学工业出版社，2019年。

2.   袁婺洲主编，《基因工程》。北京，化学工业出版。2010年。

3.   《基因工程》在线开放课程，袁婺洲、万永奇、范雄伟主讲，中国大学MOOC，爱课程网。

4.   《转基因的科学--基因工程》在线开放课程，袁婺洲、万永奇、范雄伟主讲，知到APP，智慧树网。