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病理切片借用篇一
描述:肝小叶中央静脉周围大部分肝
细胞排列不规律,呈空泡状,胞核被挤至一侧。
诊断:肝脂肪样变
2、脾包膜玻璃样变
描述:包膜明显增厚,均质、红染、半透明。
诊断:脾包膜玻璃样变
3、肾凝固性坏死
描述:坏死区呈楔形,区内细胞结构消失,而细胞外形和组织轮廓仍存在。坏死区周围有炎性细胞浸润。诊断:肾凝固性坏死
4、肉芽组织
描述:镜下可见大量细胞和新生薄壁毛细血管,毛细血管内皮细胞胞核体积较大,呈椭圆形,向内腔突出。毛细血管周围有许多成纤维细胞。此外,还有大量淋巴细胞、中性粒细胞、浆细胞等炎性细胞浸润。
诊断:肉芽组织
5、慢性肺淤血
描述:肺泡壁明显增厚,毛细血管扩张充血,肺泡腔中可见浅红色水肿液、红细胞及含有棕黄色含铁血红素的巨噬细胞。肺泡间隔纤维组织轻度增生。诊断:慢性肺淤血
6、慢性肝淤血
描述:淤血以中央静脉为中心。中央静脉及其周围的肝窦明显扩张,充满红细胞。有的淤血区连成淤血带。小叶中央区的肝细胞萎缩、消失,致使肝细胞索稀疏、离散、紊乱。小叶周边区的肝细胞脂肪变。
诊断:慢性肝淤血
7、血栓的机化与再通
描述:切片中可见一动脉的横断面,波浪状红染折光的为内弹力膜,其内即为血栓。血栓大部分已为毛细血管、纤维母细胞(肉芽组织)所取代,仅残存少许成分呈均质红染状。一些较大的裂隙有内皮细胞被覆。
诊断:血栓的机化与再通
8、急性阑尾炎(蜂窝组织炎)
描述:管壁全层大量中性粒细胞弥漫性性浸润,可见白细胞和纤维素被肌纤维束分割的现象。
诊断:阑尾纤维组织炎
9、结核性肉芽肿
描述:①病灶呈结节状
②结节中单核细胞、巨噬细胞已转变为上皮样细胞及朗格汉斯巨细胞 ③结节周围有纤维母细胞及淋巴细胞
④部分结节中心有干酪样坏死
诊断:结节性肉芽肿
10、肉瘤
描述:肿瘤细胞丰富,弥漫性分布,间质胶原纤维少。肿瘤细胞梭形、卵圆形、不规则形,大小不等。细胞核异型性明显,可见较多的病理性核分裂象。
诊断:肉瘤
11、皮肤鳞状细胞癌
描述:上皮细胞失去正常排列方式而突破基底膜侵入真皮,形成巢状的细胞团(癌巢),癌巢中央为红染的角化珠。
诊断:皮肤鳞状细胞癌
12、肠腺癌
描述:正常肠腺粗而长、大小均一,细胞核大小均
一、排列整齐。癌变肠腺细胞排列成不规则腺样结构,具有明显的细胞异型性和组织异型性。细胞层数增加,细胞核大小不等、形态各异。腺体也大小不一。病变周围有大量炎症细胞浸润。
诊断:肠腺癌
13、风湿性心肌炎
描述:①与心肌间质内、小血管周围,可见风湿小体,成梭形。
②小血管周围有大量风湿细胞,细胞体积大,胞质丰富,嗜碱性,核膜厚、清晰,核仁突出,似枭眼状。
③病变周围有少量成纤维细胞和淋巴
细胞浸润
诊断:风湿性心肌炎
14、原发性颗粒性固缩肾(高血压肾)
描述:①肾小球入球小动脉玻璃样变性②小叶间动脉内膜纤维组织增生,管壁增厚,官腔变窄,有的亦有玻璃样变性③部分肾小球纤维化、玻璃样变,所属肾小管萎缩、消失
④肾间质纤维结缔组织增生伴少许淋巴细胞浸润
⑤部分肾小球代偿性肥大,所属肾小管
代偿性扩张,有些肾小管内可
见圆形、均质红染的蛋白管型
诊断:原发性颗粒性固缩肾
15、动脉粥样硬化
描述:动脉内膜灶性增厚,增厚区表面纤维结缔组织增生、玻璃样变,其下方可见红染的坏死崩解产物、胆固醇结晶(针状裂隙)、钙盐沉着,并可见少量肉芽组织、淋巴细胞及泡沫细胞。
诊断:动脉粥样硬化
16、大叶性肺炎
描述:①肺泡腔内大量纤维素渗出,交织成网,网中有大量中性粒细胞,可见少量红细胞。
②部分肺泡腔毛细血管充血水肿,也有毛细血管受压闭塞。
诊断:大叶性肺炎
17、硅肺
描述:肺组织中可见散在分布的大小不等的硅结节,有细胞性结节(有吞噬硅尘的巨噬细胞聚集组成)、纤维性结节(结节内成纤维细胞增生,结节发生纤维化而成)及已玻变的结节。有的结节中央成蓝色,已发生钙化。周围肺组织纤维组织增生,有大量碳末沉着。肺泡腔内有大量巨噬细胞。肺膜显著增厚。诊断:硅肺
18、高分化肺腺癌
描述:癌细胞沿肺泡壁、肺泡管壁呈单层或多层生长、扩展,形似腺样结构;肺泡间隔未被破坏,肺泡轮廓依然保留。
诊断:高分化肺腺癌
19、慢性萎缩性胃炎
描述:胃黏膜层变薄,黏膜腺体减少,间质纤维增生并伴有慢性炎细胞浸润,局部粘膜腺上皮有肠上皮化生及不典型增生。
诊断:慢性萎缩性胃炎
20、消化性溃疡
描述:溃疡呈潜掘状,可分为4层结构:①第一层有少量炎性渗出物构成,主要是纤维蛋白和中性粒细胞。
②第二层为均质红染的坏死组织 ③第三层为肉芽组织层,有较多的单核细胞浸润
④第四层为纤维瘢痕层,细胞成分少,胶原纤维增粗,小动脉纤维性增厚,官腔狭小。
诊断:消化性溃疡
21、肝硬化
描述:①正常肝小叶结构消失,为假小叶所取代。②假小叶内肝细胞水肿、脂肪变,再生现象明显。③假小叶内中央静脉的数
量与位置与正常肝小叶不同。
④假小叶周围由纤维组织构成纤维间隔,其中有淋巴细胞、单核细胞浸润及小胆管增生。诊断:肝硬化
22、肝细胞肝癌
描述:①肿瘤细胞呈多角形,胞质丰富,嗜酸性强;排列成肝索样结构,但宽度远大于单排细胞厚度的正常肝板,正常肝小叶结构消失。
②部分癌细胞胞质内可见胆汁颗粒,毛细血管内可见胆汁淤积。
③癌组织富含血窦状裂隙,肿瘤间质少。
诊断:肝细胞肝癌
23、霍奇金淋巴瘤
描述:以反应性炎细胞浸润为背景,数量不等、形态不一的肿瘤细胞散布其间。瘤细胞胞质丰富,至少双核或多核,核椭圆形,核膜厚,染色质少,每核内有一大而醒目的、病毒包涵体样,具周围空晕的嗜酸性核仁(镜影细胞、霍奇金细胞、干尸细胞、陷窝细胞、爆米花细胞)。诊断:霍奇金淋巴瘤
24、急性弥漫性增生性肾小球肾炎
描述:①病变弥漫分布,绝大多数肾小球体积增大,充满球囊腔。
②血管球内细胞(内皮细胞和系膜细胞)明显增生,伴中性粒细胞和单核细胞浸润。
③毛细血管腔狭窄甚至闭塞。
④肾小管上皮细胞水肿及玻璃样变,主要见于进区小管。
⑤肾小管管腔内可见蛋白管型。⑥肾间质水肿疏松,小血管扩张。诊断:急性弥漫性增生性肾小球肾炎
25、快速进行性(新月体性)肾小球肾炎
描述:①大部分肾小球体积增大,球囊壁层上皮细胞增生,状如新月,即新月体,并伴有炎性细胞浸润。②肾小管上皮细胞变性,腔内充满均质红染的透明管型。
③肾间质血管扩张充血,并伴有炎性细胞浸润。
诊断:新月体性肾小球肾炎
26、慢性肾盂肾炎
描述:①肾小球周围纤维化,球囊增厚而发生肾小球玻璃样变。
②肾小管代偿性扩张,可出现透明管型或胶样管型(类似甲状腺)
③局灶性淋巴细胞、浆细胞浸润,间质纤维化。
诊断:慢性肾盂肾炎
27、葡萄胎
描述:①绒毛间质高度水肿,黏液变性而增大。
②绒毛间质内血管消失或无能。
③滋养层(细胞滋养层、合体滋养层)细胞有不同程度的增生。
诊断:葡萄胎
28、绒毛膜癌
描述:①癌组织由分化不良的细胞滋养层和合体滋养层两种瘤细胞组成②两种细胞排列成巢状或条索状,细胞异型性明显,核分裂象多见。③癌细胞不形成绒毛结构。④肿瘤自身无间质血管,依靠侵袭宿主血管获取营养,故癌组织和周围正常组织有明显出血、坏死。诊断:绒毛膜癌
29、粉刺癌
描述:①乳腺导管轮廓较清楚,官腔扩张,正常导管上皮被癌细胞所取代。②癌细胞实性排列,中央坏死,坏死区可伴有钙化。
③导管周围间质纤维组织增生和慢性炎细胞浸润。
诊断:粉刺癌
30、弥漫性非毒性甲状腺肿
描述:①甲状腺滤泡上皮增生,呈立方状或低柱状。
②大部分滤泡上皮复旧变扁平,滤泡腔高度扩大,腔内大量胶质储积。
③间质纤维结缔组织增生、间隔包绕形成大小不一的结节状病灶。
诊断:弥漫性非毒性甲状腺肿
31、流行性乙型脑炎
描述:①神经细胞变性坏死,其周围有胶质细胞围绕形成卫星现象,小胶质细胞侵入坏变的神经细胞内形成嗜神经现象。②局部脑组织液化性坏死,形成筛状软化灶③血管扩张充血,血管周围间隙内以淋巴细
胞为主的炎性细胞形成淋巴细胞血管套状浸润。
④胶质细胞增生,形成胶质小结。诊断:流行性乙型脑炎
32、肺结核
描述:肉芽肿境界清楚,中央为红染颗粒状、无结构的干酪样坏死区,围绕干酪样坏死物周围有上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞,并伴有淋巴细胞浸润和成纤维母细胞。
诊断:肺结核
33、结肠细菌性痢疾
描述:结肠粘膜表层上皮细胞消失,由纤维素、中性粒细胞及坏死组织组成的物质被覆(假膜)。粘液腺体腺腔扩张,内滞留淡蓝色液体;部分腺体被破坏。肠壁各层充血水肿,有中性粒细胞及巨噬细胞浸润。
诊断:结肠细菌性痢疾
34、肠伤寒
描述:增生活跃的巨噬细胞吞噬伤寒杆菌、红细胞、淋巴细胞、浆细胞和细胞碎片形成伤寒细胞。伤寒细胞常聚集团,形成小结节,即伤寒肉芽肿。
诊断:肠伤寒
35、肠阿米巴溃疡
描述:溃疡呈口小底大的烧瓶状,边缘呈潜掘形。病灶周围炎症反应轻微,溃疡边缘与正常组织交界处及肠壁小静脉内可见阿米巴滋养体。
诊断:肠阿米巴溃疡
36、血吸虫病性肝硬化
描述:病灶内巨噬细胞变为上皮样细胞和少量异物巨细胞,病灶周围有淋巴细胞浸润和肉芽组织增生,形态上似结核样肉芽肿(称假结核结节)。注:无假小叶形成。
诊断:血吸虫病性肝硬化
病理切片借用篇二
xxx医院病理科切片借出存根
病理号:患者姓名:切片:张押金:元 借片日期借片人:联系电话(手机): 身份证号码 :
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xxx医院病理科切片借条
病理号:患者姓名:切片:张押金:元借片日期经手借片人:借片人需认真阅读以下借片须知
1、患者因转诊或外地会诊需要借片者,须填写借片条,由专人负责办理借片手续,每张切片收押金100元。
2、借片期限:本地区7天,本地以外地区14天。超出借片期限每天每张切片加收罚金10元。
3、凡损坏或丢失切片者,概不退回押金并加倍赔偿。
4、蜡块为科室无法复制的重要档案,一般不外借;会诊单位确需借蜡块时,在归还所借切片后可以借出,每个蜡块收押金200元,凡损坏或丢失蜡块者,概不退回押金并加倍赔偿,借蜡块期限同借片期限。
5、为加强交流,请在归还切片(或蜡块)时,将会诊单位病理诊断(会诊报告)复印一份交本科存档,如会诊单位未发会诊报告,敬请会诊者将会诊结果填入下表并签名盖章。凡会诊未告知结果者概不退回押金。
病理号 患者姓名本单位病理诊断会诊单位病理诊断——————————————————————————————————
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病理切片借用篇三
1号 猪肝(作图)
病变:(1)肝组织血量增多,肝小叶的中央静脉及其周围的窦状隙扩张,充满红细胞,小叶间静脉扩张,充满血液。
(2)淤血明显处肝细胞索变细萎缩,肝小叶边缘细胞出现脂肪变性。(3)局部可见淤血性硬化。诊断:急性肝淤血 3号 鸡心脏
病变:1.心肌纤维排列紊乱,肿胀变粗,横纹淡化或消失,肌原纤维模糊不清。2.在肌原纤维之间可见多量粉红色颗粒状或空泡状结构,核周隙明显可见。诊断:心肌细胞肿胀(颗粒变性)5号 鸭肝脏(作图)
病变:肝细胞体积肿大,胞浆内出现大小不等的脂滴,有些数个小脂滴融合成一个大脂滴,胞核因受压而缩小,常呈半月形位于细胞的一侧,以至整个细胞变成充满脂肪的大空泡,如同戒指状。诊断:肝脏脂肪变性 10号 鸡肝
病变:1.部分肝细胞变性、坏死,肝索结构消失; 肝血窦扩张,充满大量形态和大小基本一致的成淋巴细胞;
成淋巴细胞胞核圆形或椭圆形,淡染,呈空泡状,染色质呈网状或细颗粒状,有1-2个核仁,胞质为弱嗜碱性,胞膜多模糊不清。病灶中常见核分裂象,多见细胞坏死的核崩解颗粒。诊断:禽白血病 30号 猪肝脏(作图)
病变:1.肝小叶间及小叶内结缔组织明显增生,形成大小不等的假小叶。假小叶中央静脉偏于一侧或者缺如。
2.肝细胞体积缩小,数量减少。
3.间质中有大量的淋巴细胞浸润和大量的小胆管增生,有些胆管无管腔。诊断:中毒性肝硬变 2号 牛肺脏
病变:⑴肺内小静脉及肺泡壁毛细血管高度扩张,充满红细胞,肺泡壁增厚。
⑵细支气管管腔及大多数肺泡腔内出现淡红色浆液和数量不等的红细胞、心衰细胞(即吞噬了红细胞和含铁血黄素的巨噬细胞)。诊断:肺淤血 9号 猪肺
病变:1.肺泡间隔、支气管周围、小叶间质等间质明显增宽,增宽的间质中有淋巴细胞、巨噬细胞浸润;肺泡间隔、小叶间隔内血管充血、水肿。
2.肺泡受压萎缩或者消失;肺泡腔内有少量浆液、巨噬细胞、淋巴细胞和脱落的肺泡上皮细胞;少量肺泡中充满丝网状纤维素。
3.在细支气管、血管周围有多量淋巴细胞浸润,形成淋巴小结。诊断:慢性间质性肺炎(猪喘气病)8号 猪肺脏(作图)
病变:1.病灶以细支气管为中心,细支气管管壁增厚、充血、水肿,并有多量的中性细胞浸润;管腔内充满红染的浆液、嗜中性粒细胞、巨噬细胞、红细胞和脱落的支气管上皮细胞。
2.支气管周围肺泡的肺泡壁毛细血管扩张、充血,肺泡内也充满了上述炎性渗出物和脱落的肺泡上皮细胞,3.炎症病灶周围的肺泡扩张,呈代偿性肺气肿。肺泡腔扩大,肺泡壁变薄。
诊断:小叶性肺炎 7号 猪肺脏
病变:肺泡腔中红细胞大部分溶解消失,肺泡腔内充满多量的中性粒细胞、丝网状纤维素和少量的红细胞及浆液。肺泡壁受压变薄,充血已不明显。支气管管腔内也有上述渗出物。
诊断:大叶性肺炎(灰色肝变期)21号 猪肺
病变:1.胸膜明显增厚,胸膜下有大量炎症渗出物,肉芽组织增生; 2.肺泡间隔增宽,增宽的间质中有多量单核淋巴细胞浸润; 3.部分肺泡受压萎缩或者消失,局部可见肺泡融合。诊断:间质性肺炎+胸膜炎(猪蓝耳病继发副猪嗜血杆菌)
4号 猪肾脏
病变:1.肾小球毛细血管扩张充血,内皮细胞和系膜细胞肿胀增生,致使肾小球体积肿大,几乎充满整个肾小囊腔。囊腔内可见粉红的蛋白液和红细胞;少量肾小球结构消失,充盈粉红色蛋白液。
2.肾小管上皮细胞肿胀,变性,可见粉红色蛋白颗粒(透明滴);管腔狭窄。
诊断:急性增生性肾小球肾炎 12号 牛肾脏
病变:1.肾小管数量减少,小管间结缔组织增生并有大量淋巴细胞浸润,致使肾小管萎缩或消失。
2.残留的肾小管上皮细胞肿胀或脱落,可见粉红色蛋白颗和透明管型。
3.肾小球数量明显减少,体积缩小或消失。诊断:慢性间质性肾炎 19号 猪肾
病变:1.肾间质小血管和毛细血管扩张,充满红细胞,部分肾间质有大量红细胞浸润。
2.部分肾小管上皮细胞肿胀和脱落,出现颗粒变性和水泡变性,局部可见含铁血黄素。
诊断:肾间质充血和出血(猪瘟)
20号 鹅心脏
病变:1.心肌纤维排列紊乱,局部可见波浪状排列,部分心肌纤维断裂; 2.部分血管扩张充血,在其周围有脂肪浸润;
3.心肌纤维肿胀,横纹模糊或消失,胞浆中出现多量红染、均质无结构的玻璃样物质。诊断:心肌细胞蜡样坏死(硒缺乏症)23号 猪心脏
病变:1.心肌纤维萎缩肿胀、均质化、碎裂、粒球状分解,横纹消失、断裂,肌纤维间隙增宽。
2.心肌纤维间有多量炎性渗出物,心肌纤维受压萎缩变细,炎性细胞主要为单核细胞和淋巴细胞。
3.局部心肌纤维出现细胞肿胀、肌纤维溶解或蜡样坏死,血管充血出血。诊断:病毒性心肌炎(恶性口蹄疫)
17号 猪乳房(作图)
病变:1.乳腺腺管中充满粉红色的乳蛋白液和多量嗜中性粒细胞; 2.腺上皮细胞明显水肿、坏死、脱落。诊断:化脓性乳腺炎
18号 猪淋巴结
病变:1.淋巴组织坏死,其固有结构破坏,细胞崩解,形成大小不一的坏死灶,有的坏死灶内有大量红细胞。
2.坏死灶周围血管扩张、充血、出血,并可见中性粒细胞和巨噬细胞浸润。
3.淋巴窦扩张,其中有多量巨噬细胞、红细胞、白细胞和组织坏死崩解产物。
诊断:坏死性淋巴结炎(猪瘟)
15号 鸡脾脏
病变:脾髓内充满大量血液,脾实质细胞(淋巴细胞、网状细胞)坏死、崩解、数量减少;白髓体积缩小,甚至完全消失,仅在中央动脉周围残留少量淋巴细胞;红髓中固有的细胞成分也大为减少。局部组织完全失去正常结构,细胞变性、坏死,可见多量核碎块。诊断:急性炎性脾肿
24号 猪结肠
病变:1.结肠中段粘膜正常结构消失,大部分呈同质化,见嗜中性粒细胞浸润,并有纤维素和脱落的上皮细胞。
2.粘膜下层结构疏松,见多量嗜中性粒细胞浸润,小血管扩张,内充满红细胞。
诊断:固膜性肠炎
16-1号 牛大脑(作图)
病变:脑血管周围间隙内出现一层或几层嗜酸性粒细胞,围绕血管,形成“管套”。部分神经元结构模糊,核溶解消失。神经胶质细胞呈局灶性或弥漫性增生。诊断:嗜酸性粒细胞性脑炎
16-2号 猪脑(作图)
病变:脑血管周围间隙内出现一层或几层淋巴细胞,围绕血管,形成“管套”。部分神经元结构模糊,核溶解消失。神经胶质细胞呈局灶性或弥漫性增生,形成卫星现象和嗜神经原现象。诊断:猪病毒性脑炎(猪伪狂犬)
病理切片借用篇四
借户口证明(存根)
兹有,性别,身份证号:
为我院级专业班学生,因(结婚、生育)结婚登记需借用户口,请贵处予以办理。
特此证明!
经办人:经办人:
单位(盖章)计生办(盖章)日期:日期:
……………………………………………………………………….证明
兹有,性别,身份证号:
为我院级专业班学生,因(结婚、生育)登记需借用户口,请贵处予以办理。
特此证明!
经办人:经办人:
单位(盖章)计生办(盖章)日期:日期:
(此证明交保卫处户籍科)
病理切片借用篇五
病理切片
病理切片 :
病理切片
bìnɡ lǐ qiē piàn
病理标本的一种。
制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理,使之固定硬化,在切片机上切成薄片,粘附在玻片上,染以各种颜色,供在显微镜下检查,以观察病理变化,作出病理诊断,为临床诊断和治疗提供帮助。
病理切片的制作
1.取材
具体要求如下:
(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定
(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
(2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到充分的固定。
(3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本,可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。
最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.脱水透明标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。
脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。
丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。
4.浸蜡、包埋
(1)使石蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。
(2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包在其中,称蜡块,此过程称为包埋。
5.切片和贴片
(1)修整蜡块:可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。
(2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪
(3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。
(4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。
(5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,石蜡切片的厚度一般在4~6μm。
(6)切片
(7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的张力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。
(8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的石蜡。
6.染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红(hematoxylin-eosin)染色法,简称h.e染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在h.e染色的切片中均呈红色。
h.e染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固
常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美国家的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄g(orangeg)、比布里希猩红(biebrich scarlet)、波尔多红(bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。