2025年蛋白质等电点实验结果讨论 蛋白质等电点的测定实验小结(三篇)

蛋白质等电点实验结果讨论 蛋白质等电点的测定实验小结篇一

1、上班前检查油窗机油是否正常，磨刀装紧，轮部注入1-2滴机油；

2、操作工除对机器进行必要的保养外，不得随意拆卸，必须保持机器完整；

3、操作时必须佩带专用的钢丝手套；

4、下班前必须清扫机器灰尘；

5、严禁他人随意操作。

放布机操作规程

1、上班前先检查机器各部分是否正常，并加注润滑油；

2、各传动部位不准有布条等缠绕物，发现有异物应及时消除；

3、中途离岗必须关掉电源；

4、下班前切断电源，清理检查灰尘方可下班。

粘合机的操作规程

1、检查各部位是否正常，输送带内是否有杂物，输送带是否清洁；

2、开启总电源，开启输送电源前，先把调速开关低于低速位，然后根据技术要求把速度调至适当速度，开启加温调节器，把温度调至所需温度；

3、开机前把压力调至最低，当温度达到温度后，把压力加至规定压力，开始工作，操作中经常注意输送带调编工作是否正常，严禁有产品卷入输送带内；

4、根据技术和检验要求，必要时对产品进行检验和实验，确认粘合结果合格后进行批量生产；

5、生产过程中必须保持输送带清洁，生产途中停电必须及时用手柄把产品从输送带中摇出，并使输送带运动一定时期进行冷却；

6、生产结束先停止加温，把压力调至最低，使输送带继续工作一定时间至输送带冷却后，对输送带进行清洁保养后，切断电源加上机罩。

精裁机的操作规程及保养

1、上班前先检查机器各部分是否正常，并加注润滑油；

2、操作时必须佩带规定的专用手套；

3、清扫机器必须切断电源后进行；

4、下班前必须关掉电源，并把机器罩好；

5、严禁操作工任意串岗操作。

电钻的操作规程及保养

1、上班前检查电钻有无异常响声；

2、操作工不得任意拆卸零部件，必须保持机器完整；

3、下班前必须清扫机器卫生，电源切断后方可下班；

4、严禁他人随意操作。

电加热裁布机的操作规程及保养

1、上班前检查机器各部位是否正常，并对机器进行必要的清洁；

2、在操作过程中发现异常应及时关机检查，自己不能解决的请机修工检查，确认正常后方可继续操作；

3、中途离岗必须关掉电源，更换电热丝必须在关机的状态进行；

4、严禁他人操作。

气泵的使用及保养

1、上班前必须排掉冷凝水，并检查油窗机油是否正常；

2、开机后检查声音有无异常，检查压力表是否标准；

3、下班前必须关掉电源，清理灰尘；

4、严禁他人操作。

大烫熨斗的使用及保养

1、上班前打开蒸汽进出阀门，并排出积水；

2、工作中发现异常应立即关掉进出阀门检查；

3、下班前将熨斗放在指定位置；

4、严禁他人随意操作。

烫台的使用和保养

1、上班前打开电源检查吸风电机有无异常响声；

2、检查烫台布是否完好；

3、下班前关闭电源并清理台面卫生；

4、严禁串岗操作。

大白扣使用及保养

1、上班前先检查机器各部分是否正常，并加入润滑油；

2、检查保险装置是否正常，使用前空踩机器检查；

3、下班前必须清扫机器卫生，电源切断后方可下班；

4、严禁他人随意操作。

蛋白质等电点实验结果讨论 蛋白质等电点的测定实验小结篇二

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等电点聚焦测蛋白质等电点 1.了解蛋白质的两性解离性质和等电点聚焦的原理； 2.学习测定蛋白质等电点的方法并掌握圆盘电泳技术。

二.实验原理 等电点聚焦（ief）是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展，ief 实质 就是在稳定的 ph 梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。

在电场中充有两性载体和抗对流介质，当加上电场后，由于两性载体移动的 结果，在两极之间逐步建立起稳定的 ph 梯度，当蛋白质分子或其它两性分子存 在于这样的 ph 梯度中时，这种分子便会由于其表面电荷在此电场中运动，并最 终到达一个使其表面静电荷为 0 的区带，这时的 ph 则是这种分子的 pl。聚焦在 等电点的分子也会不断地扩散。一旦偏离其等电点后，由于 ph 环境的改变，分 子又立即得到正电荷或负电荷，从而又向 pl 迁移。因此，这些分子总是处于不 断地扩散和抗扩散的平衡之中，在 pl 处得以“聚焦”。

三.实验步骤 1.凝胶制备 按表 1 的比例配制 4ml 工作胶液，在真空干燥器中抽气 10min。每组 4 管，每管 加胶液 1.8ml。混匀后立即注入到已准备好的凝胶管中，胶液加至离管顶部 1cm 处，在胶面上再覆盖 3mm 厚的水层，应注意不要让水破坏胶的表面，室温下放置 20〜30min 即可聚合。

表 1 凝胶工作液配比 凝胶母液（丙烯酰胺 30%甲叉双丙烯 酰胺 0.8%）

1ml 10%±硫酸铵 0.02ml 水 2.68ml 载体两性电解液 0.15ml 蛋白样品液 0.1ml,0.05ml temed 0.02ml 2.电泳 吸去凝胶柱表面上的水层，将凝胶管垂直固定于圆盘电泳槽中。于电泳槽下槽加 入0.2 %的 500ml 硫酸作正极；上槽加入 0.5 %的 800ml 乙醇胺作负极打开电源，/ 4

将电压恒定为 300v,因为聚焦过程是电阻不断加大的过程，故聚焦电泳过程中，电流将不断下降，降至稳定时，即表明聚焦已完成，继续电泳约 30min 后，停止 电泳，全程约需 3h。

3.剥胶 电泳结束后，取下凝胶管，用水洗去胶管两端的电极液，按照柱状电泳剥胶的方 法取出胶条，以胶条的正极为“头”，负极为“尾”，正极端呈酸性，负极端呈碱 性。剥离后，量出并记录凝胶的长度。

4.固定 取其中的凝胶条 3 根置于一个小培养皿内，倒入 10%放在三氯乙酸固定液中固定，约半小时后，即可看到胶条内蛋白质的白色沉淀带。

固定完毕，倒出固定液用直 尺量出胶条长度 l i 和正极端到蛋白质白色沉淀带中心，即聚焦部位的长度 l 2 o 梯度的测量 切段法：将未经固定的 1 根胶条，按照从正极端（酸性端）到负极端（碱性端）的顺 序切成相等的 10 段，按次放人有标号的、装有 0.0im 氯化钾的试管中，浸泡过 夜。然后用 ph 计测出每管浸泡液的 ph 并记录。

四•实验结果 1.凝胶条的长度及染色蛋白带的位置 凝胶条编号 1 2 3 4 固定前的长度 7.8cm 7.8cm 7.4cm 7.7cm l o

固定后的长度 7.7cm 7.8cm 7.4cm 未染色，测 ph l 1

梯度 蛋白带距酸端 1.3cm 1.4cm 1.3cm

距离 l 2

蛋白质距正极 1.32cm 1.4cm 1.3cm

实际长度 l s

梯度表及其相应标准曲线 标号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 长度 /cm 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 ph 值 3.05 3.72 5.04 6.76 7.24 7.99 8.62 9.58 10.1 4 10.1 8 / 4

蛋白质样品等电点的计算：

蛋白质聚焦部位距凝胶条正极端的实际长度 =固定后的蛋白区带中心距凝胶条正 极端的距离*固定前凝胶条长度/固定后凝胶条长度 则将上述数据代入 l f l 2 *

-l o，求出蛋白质距正极实际长度 l s 分别为 1.3cm、1.4cm、l i

1.3cm o 由凝胶条 1、2 和 3 及其相应蛋白带距离可计算出蛋白带距酸端的平均距 离：(1.3+1.4+1.32)/3=1.34 ②计算出蛋白质聚焦部位距凝胶条正极端的实际长度后，直接从 ph 梯度曲线上 求出该蛋白质等电点。

得出其标准公式为：y = 0.8372x + 2.6273 则待测蛋白质的等电点为 0.8372*1.34+2.6273=3.75 五•实验分析及讨论(1)实验结果测得的样品蛋白的等电点为 3.75，通过查常见蛋白质等电点参 考值表格可知，其为 b-卵黄脂磷蛋白。由于记录凝胶长度及蛋白质距正极的距 离存在读数误差，所以也可能是伴花生球蛋白(3.7-5.0)o(2)

等电点聚焦测蛋白质等电点分辨率高，可将等电点相差 0.01 — 0.02ph 单位 的蛋白质分开。不像一般电泳易受扩散作用影响，使区带越走越宽；聚焦电泳则 能抵消扩散作用，使区带越走越窄。同时，很稀的样品也可以聚焦而浓缩，实验 操作起来也简单方便。

(3)其存在其不足之处是在实验操作过程当中，读数的取值、样品溶液是否含 盐、在等电点时蛋白质是否溶解或变性，都会影响实验结果。因为盐会增大电流 量，产生热量；盐分子移至两极时，将产生酸或碱，中和两性电解质。由于这些 影响因素的存在，个人认为利用这一种方法还不足以鉴定出蛋白质种类。/ 4

附 常见蛋白质等电点参考值

第电点 实 m 质 sffe

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水、电、办公用品管理制度

为规范公司水、电、办公用品的使用，确保办公所需，倡导勤俭节约、物尽其用、杜绝铺张浪费、大手大脚，管好用好办公物品，特制定本制度。

一、节约用水

1、自然用水将龙头尽量开小，用完随手关闭，坚决避免“长流水”现象发生。

2、饮用水量身倒水，杜绝“剩半杯”现象，给顾客倒水以六七分为宜，喝完再续。饮水机一经发现漏水等损坏情况立即保修。

二、节约用电

1、强化照明系统节电。办公时间要充分利用自然光照，在阳光充足、室内光线好的情况下不开灯，长时间离开办公室或下班时要做到人走灯灭。

2、注重用电设备节电。各部门人员使用电脑、传真机、复印机等办公自动化设备时，尽量减少开启和使用次数，长时间不使用或下班后要彻底切断电源，减少办公设备待机能耗。

3、办公室、会议室等办公区域做到无人时不开空调，开空调时不开门窗。

三、节约办公用品（规定中的办公用品分为固定资产和一般办公用品）

1、固定资产主要指：桌椅、公文柜、电脑、电话机、打印机、饮水机、车辆等。

2、一般办公用品包括剪刀、胶带、橡皮擦、回形针、直尺、订书器、涂改液、裁纸刀、笔、信笺、笔记本、打印纸、复印纸、复写纸、印泥、钉书针、大头针、夹子、名片、账册、卷宗、档案袋（盒）、标签、纸杯、计算器、电池等。

3、节约用纸。公司鼓励员工尽量双面打印纸张，一面留白废纸应作草稿使用。

4、公司员工请自带饮水杯具，一般情况下禁止使用一次性纸杯。

5、尽量减少电话的通话时间，尽量长话短说；禁止私人电话与办公电话捆绑；禁止在办公场所用办公电话聊天。

6、节约办公用品。保管和使用好自己的办公用品，申领有度。对办公电器要注意保管和维修，长时间不用应切断电源，降低折旧。

7、办公用品应为办公所用，不得据为己有，不得移作他用或私用。

8、所有员工要勤俭节约，杜绝浪费，不许将办公用品随意丢弃废置，努力降低消耗和办公费用，精心使用办公设备。